(1)液体浅层培养：纯化后的原生质体悬浮于液体培养基中，取少许于培养皿底部形成很薄的一层，封口进行培养。

优点：操作简单，易于添加新鲜培养基。

缺点：原生质体容易发生粘连，难于定点观察。

(2)固体培养：也叫琼脂糖平板法或包埋培养法。将原生质体悬浮于液体培养基后，与凝固剂（主要是琼脂或低熔点琼脂糖）按一定比例混合，在培养皿底部形成一薄层，凝固后封口培养。

优点：便于观察，有利于减少有害释放物的影响

(3)固液双层培养法：在培养皿底部先铺一层固体培养基，待凝

固后再在其上进行液体浅层培养。

优点：固体培养基中的营养成分可以被液体层中的原生质体吸收利用，而原生质体产生的有毒物质可以被固体培养基吸收

原生质体融合（体细胞杂交）有哪些主要应用

（1）突破生殖障碍，克服有性杂交不亲和，创造新异核体细胞杂种

（2）转移优异农艺性状，创造新的种质材料

（3）选择性转移胞质基因和基因组，创造胞质杂种，研究质核互作和体细质基因遗传

原生质体融合有哪些方法

（1）自发融合：酶解细胞壁过程中，有些相邻的原生质体彼此融合形成同核体。来源于分裂旺盛细胞的原生质体，自发融合的频率较高

（2）化学融合：NaNO3法、高pH-高钙法、聚乙二醇（PEG）诱导法、多聚化合物法

（3）电场诱导法（细胞电融合，主要是双向电泳法）：原生质体接触－质膜融合－圆球化－核融合

优点：避免化学物质的潜在毒害

融合率：与原生质体来源、体积、链的长度、脉冲持续时间及电压等因素有关。

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